提取廢水、糞便、腸內容物、生物固體病毒、細菌總核酸
產品特點
- 針對復雜樣品——從廢水、糞便、生物固體、腸道內容物等復雜樣品中提取病毒、細菌DNA、RNA?
- 專利抑制因子去除技術（Inhibitor Removal Technology®）——去除包括多糖、脂類、亞鐵血紅素等PCR抑制因子，核酸可直接用于下游應用
- 可選的珠磨研磨——固體樣品和細菌細胞選用玻璃研磨珠管裂解，提取液體樣品病毒核酸無需珠磨研磨
描述
PowerViral® Environmental RNA/DNA Isolation Kit 專門設計用于快速簡便提取富含PCR抑制因子的廢水、糞便、生物固體、腸道內容物等環境樣品中的病毒、細菌總核酸。專利的抑制因子去除技術（Inhibitor Removal Technology®）確保去除這類樣品中的抑制因子，如腸內容物中未消化的植物殘渣、裂解紅細胞產生的亞鐵血紅素。最終洗脫到RNase-Free Water的DNA和RNA可直接用于PCR、cDNA合成或RT-qPCR等下游應用。
操作預覽
糞便樣品或含有固體物質的樣品，需在珠磨研磨步驟使用0.1mm玻璃研磨珠套管加上加強型化學裂解緩沖液以保證頑固微生物的充分有效裂解。要提取水樣或其它不需要打碎的樣品的病毒核酸，可忽略珠磨研磨步驟，只要化學裂解即可。
若需要DNase消化處理，推薦使用DNase Max® Kit（貨號：15200-50），創新地利用室溫穩定的DNase酶有效去除基因組DNA。每次可在20min內消化30μg DNA，DNase酶使用專利樹脂輕易去除。無需加熱或EDTA滅活DNase。使用RTS DNase™ Kit，RNA性質保持穩定，仍維持原有質量。
研究與深入
A.
B.
C.
圖1. 使用PowerViral® 環境RNA/DNA提取試劑盒獲得高得率病毒核酸
MO BIO、Zymo和Qiagen的試劑盒分別從分子生物學級純水（提取效率對照）、生物固體提取物、糞便懸液和1MDS濾膜濃縮地表水提取添加了log10 copies /ml（通過qPCR確定）的A）Ⅱ型腺病毒（AdV）、B）Ⅰ型脊髓灰質炎病毒（PV1）和C）噬菌體MS2（MS2）的結果比對。水平軸上每種基質環境樣品分別加入三種病毒（水平軸1、2、3）。為了適應三款試劑盒上樣量和洗脫體積的不同，原始加標病毒濃度通過qPCR數據計算并轉換成log10 copies /ml。只有PowerViral® Environmental RNA/DNA Isolation Kit能檢測出所有類型樣品中的病毒核酸。數據由圖森市亞利桑那大學的B. lker友情提供。
圖2. PowerViral™ 環境RNA/DNA提取試劑盒提取的核酸含更少的抑制因子
往2.5μl核酸提取物中加入鼠諾如病毒質粒（pMNV）（1.0×105拷貝/PCR管）作為內參，通過qPCR分別檢測三款試劑盒所提取的總核酸PCR抑制因子情況。每種不同基質環境樣品（生物固體提取物、糞便懸液和1MDS濾膜濃縮地表水）的三個樣品（水平軸1、2、3）都經過測試。只有PowerViral® Environmental RNA/DNA Isolation Kit在所有樣品類型中提取效果都更好。數據由圖森市亞利桑那大學的B. lker友情提供。
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規格
| 方法 |
硅膠離心柱型 |
| 細胞破碎 |
研磨珠破碎（可選） |
| 濾膜吸附能力 |
40μg每孔 |
| 液體樣品處理量 |
200μl |
| 固體樣品處理量 |
0.25g |
| 通量 |
1 - 24 個樣 |
| 操作時間 |
45 分鐘 |
| 儀器要求 |
渦旋混合儀及適配器
離心機 |
保存條件
室溫保存2年。
- Iker, B.C., Bright, K.B., Pepper, I.L., Gerba, C.P., Kitajima, M. (2013). Evaluation of commercial kits for the extraction and purification of viral nucleic acids from environmental and fecal samples. Journal of Virological Methods, doi: 10.1016/j.jviromet.2013.03.011
試劑盒組分
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組分
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28000-50
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Solution PV1
Solution PV2
Solution PV3
Solution PV4
Solution PV5
Solution PV6
Spin Filters
2.2ml Lysate Tubes
2ml Collection Tubes
Glass Bead Tubes,0.1mm |
32ml
11ml
32ml
2×30ml
30ml
5.5ml
50
50
200
含 |
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